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怎么做可以降低ELISA試劑盒操作的布景噪音發(fā)表時間:2020-03-19 09:45 在ELISA試劑盒的操作中,我們都認為ELISA檢測的原理似乎很簡單,但要固定抗原,添加di一抗體、第二抗體和底物,并混合洗滌和關閉。然而,即使是普通的刷牙和關閉,如果做不好,可能已經破壞了整個實驗。在實驗結束時,我們能否得到有意義的信息在很大程度上取決于結果的信噪比。設定噪音會影響你對結果的判斷。今天,我們教大家如何降低ELISA試劑盒操作的設定噪音。 首先,洗滌是非常重要的:洗滌步驟看起來很無聊,事實上,非常重要,因為如果未綁定的數(shù)據(如非特異性結合抗體或檢測試劑)留在微孔板上,則會增加設定噪音。如果必要的話,可以添加洗滌液中的鹽濃度,這將阻礙非特異性結合反應。如果這套數(shù)據太高,而且你懷疑洗滌不夠,你可以測試你加入洗滌的次數(shù)。 其次,關閉是更關鍵的:關閉解決方案的作用是允許不相關的蛋白質占據微孔板中潛在的結合位點。這減少了信號抗體非特異性結合的可能性。當然,你也希望抗體只與目標蛋白結合。如果你的設置過高,并且懷疑關閉量不夠,你可以測試使用更高濃度的關閉液,或者適當延長關閉時間。 第三,抗體濃度必須優(yōu)化:我們通常跟隨兄弟姐妹留下的操作步驟,但如果試劑稍有不同,可能需要優(yōu)化抗體的數(shù)量。記住,非特異性抗體結合增加設置。為了避免這種情況,不要使用太多的初級抗體或第二抗體。 第四,檢測試劑應該是適當?shù)模毫硪稽c也很清楚:不要使用太多的檢測試劑。如果濃度太高,或者稀釋不當,就會導致高集。如果需要,也不要過度著色,優(yōu)化何時應該添加終止溶液。 |
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